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稳定性同位素内标与质谱检测
2019-08-02
       稳定性同位素内标是质谱方法(稳定性同位素稀释法)独有的,没有别的临床检测方法用到同位素内标。比如光吸收和免疫的方法,都无法分辨出被检测物和同位素内标的区别,因为它们的理化性质太接近了。如果真的加进内标,那测出来的值肯定大大的偏高。只有质谱才能把同位素内标和要检测的物质分得开,虽然它们的差别只有几个道尔顿。现在的内标基本都是稳定同位素标记的,最常见的是D和13C。同位素内标和被检测物是同一个物质,但是其中的几个氢原子被氘所取代,或者是12C换成了13C,理化性质基本不变。
        同样是标记,13C就比D要好。但是D要比13C便宜很多。绝大多数D做的内标性能是很好的。出问题的经常是一些疏水性比较差,保留时间比较短的物质。出峰的时候跟很多其它物质一起出来,些许的偏差就能引起浓度测不准。

        临床检测的数据要想测的准,离不开一条好的标准曲线。通俗来讲,标准曲线就像一把尺子。只有把尺子做准确了,才能把未知物品的长度测准确。从科学上来讲,标准曲线就是检测物质的浓度和仪器读数的一种线形关系。一般是浓度越高,读数越大。标准品的浓度是已知的,高中低都有。测完标准品以后,把它们的浓度和仪器测得的读数在x/y的坐标纸上一画,连一条线就成了。测未知的病人样品时,浓度(x)是未知的,只有仪器的读数(y),通过这条曲线可以把y换算成浓度。

        标准品应该怎么做,怎么用,这里面有很多学问。质谱是新鲜技术,大多的检测项目还买不到标准品,只能自己配。做标准品需要有纯样品。最好的纯样品应该是浓度和纯度都有保证书的,这样用起来放心。如果是液体的溶液就更好了,省去自己称量和溶解的麻烦。高浓度的纯样品要稀释到不同的低浓度才能使用。用什么来稀释是下一个非常关键的步骤,这里面牵扯到基质效应。因为基质效应这块儿瓦是质谱临床应用里比较难理解的一个概念。
 
目前同位素内标广泛应用于临床检测中:

激素检测


儿茶酚胺检测


维生素检测



全谱氨基酸检测
全谱氨基酸
1-甲基-L-组氨酸(1MHis) L-组氨酸(His)
3-甲基-L-组氨酸(3MHis) δ-羟基赖氨酸(Hyl)
L-α-氨基己二酸(Aad) 羟基-L-脯氨酸(Hyp)
L-α-氨基正丁酸(Abu) L-异亮氨酸(Ile)
L-丙氨酸(Ala) L-亮氨酸(Leu)
L-氨肌肽(甲肌肽)(Ans) L-赖氨酸(Lys)
L-精氨酸(Arg) L-蛋氨酸,L-甲硫氨酸(Met)
精氨基琥珀酸(Asa) L-正亮氨酸(Nle)
L-天门冬酰胺(Asn) L-正缬氨酸(Nva)
L-天门冬氨酸(Asp) L-鸟氨酸(Orn)
D,L-β-氨基异丁酸(bAib) O-磷酸乙醇胺(PEtN)
β-丙氨酸(bAla) L-苯基丙氨酸(Phe)
L-肌肽(Car) L-脯氨酸(Pro)
L-瓜氨酸(Cit) O-磷酸-L-丝氨酸(Pser)
胱硫醚,丙氨酸丁氨酸硫醚(Cth) 肌氨酸(Sar)
L-胱氨酸(Cys) L-丝氨酸(Sar)
乙醇酸(Cys) 牛磺酸(Tau)
γ-氨基正丁酸(GABA) L-苏氨酸(Thr)
L-谷氨酰胺(Gln) L-色氨酸(Trp)
L谷氨酸(Glu) L-酪氨酸(Tyr)
甘氨酸(Gly) L-缬氨酸(Val)
高瓜氨酸(Hcit) 别异亮氨酸(Allo-lle)
L-同型半胱氨酸(Hcy)  

新生儿遗传代谢病筛查检测



胆汁酸检测


热耳科技提供以上各项检测代谢途径全套稳定性同位素内标产品,欢迎留言索取。
 
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